樣品前處理

稱取干魚片基質(zhì)樣品5 g（精確到0.01 g）置于50 mL離心管中，加入5 mL水，振蕩混勻，加入內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)中間液（1 μg/mL）50 μL，向其準(zhǔn)確加入10 mL乙腈，渦旋振蕩2 min，置于-20℃冰箱冷凍20 min，加入陶瓷均質(zhì)子1粒以及CNW dSPE分散固相萃取管（貨號：SBEQ-CA8216-BZ，規(guī)格：4 g硫酸鎂和1 g氯化鈉），渦旋振蕩2 min，置于冷凍離心機(jī)中，轉(zhuǎn)速9 000 r/min，10℃離心5 min，上清液待凈化。

取5 mL水于CNW 吡咯烷酮-聚苯乙烯二乙烯基苯凈化管（貨號：SBEQ-CA8864-25-DZ）中渦旋振蕩后，立即加入5 mL上清液渦旋振蕩1 min，置于冷凍離心機(jī)，9 000 r/min，10℃離心5 min，得凈化液。

移取凈化液于CNW dSPE基質(zhì)分散固相萃取（貨號：SBEQ-CA8219-B，規(guī)格：1.6 g硫酸鎂和0.4 g氯化鈉）中渦旋振蕩2 min，置于冷凍離心機(jī)中，轉(zhuǎn)速9 000 r/min，10℃離心5 min。取上層有機(jī)相經(jīng)有機(jī)相尼龍針式濾器（貨號：SCAA-104，規(guī)格：13 mm*0.22 μm）過濾后，上機(jī)測試。

注意事項(xiàng)：

N-亞硝基二甲基胺在空氣環(huán)境、水源等中均有分布，且其特征離子相對較小，儀器背景值存在干擾，因此實(shí)驗(yàn)前需用乙腈代替試樣對標(biāo)準(zhǔn)涉及試劑、耗材及試驗(yàn)器皿進(jìn)行進(jìn)行空白實(shí)驗(yàn)，需特別注意實(shí)驗(yàn)用水的潔凈度，以保證方法空白本底符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

液相色譜：

a) CD-BASEWAX氣相毛細(xì)管色譜柱（30 m*0.25 mm*0.25 μm，貨號：GAEQ-548169）；

b)進(jìn)樣口溫度：220℃；

c)流速：1.0 mL/min；

d)進(jìn)樣量：3 µL；

e)進(jìn)樣方式：脈沖不分流進(jìn)樣，75psi，0.2min；

f)升溫程序：初始溫度40℃，保持0.5 min，以15℃/min升至190℃，保持1 min，以40℃/min升至240℃，保持10 min；

質(zhì)譜條件：

a)離子源溫度：230℃；

b)電離能量：70eV；

c)溶劑延遲：4min；

d)四級桿溫度：150℃。

e)監(jiān)測模式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)模式，離子對參數(shù)見下表3-1。

安譜實(shí)驗(yàn)參考GB 5009.26-2023《食品中N-亞硝胺類化合物的測定 第二法QuEChERS-氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》，采用CNW dSPE分散固相萃取管(SBEQ-CA8216-BZ)結(jié)合CNW吡咯烷酮-聚苯乙烯二乙烯基苯凈化管（SBEQ-C A8864-25-DZ）和CNW dSPE基質(zhì)分散固相萃取（SBEQ-CA8219-B）對干魚片基質(zhì)進(jìn)行處理，并使用CD-BASEWAX氣相毛細(xì)管色譜柱（GAEQ-548169）檢測分析，內(nèi)標(biāo)法計(jì)算9種N-亞硝胺類化合物標(biāo)準(zhǔn)曲線方程線性良好，R2>0.995。干魚片基質(zhì)中高、低兩水平的9種N-亞硝胺類化合物加標(biāo)回收率均在75%-110%之間，各方面均可滿足實(shí)驗(yàn)要求。