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薄層色譜TLC的定性檢測方法

更新時間:2019-07-27      點擊次數:4649
薄層色譜TLC是以涂布于支持板上的支持物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行定性與定量分析、分離和鑒定的一種層析分離技術。
 
薄層色譜TLC的定性檢測:
展開完畢后,把薄層從層析缸中取出,用鉛筆劃出或小針刺出展開劑前緣的位置,隨即進行顯色,以確定各個斑點的位置、Rf值和顯色的情況,從而判斷試樣中含有哪些組分。有色物質經展開后呈現明顯的色斑,很易判斷。對于無色物質,可根據化合物的性質,用物理檢出法、化學檢出法、酶與生物檢出法和放射性檢出法進行顯色。
1)物理檢出法:紫外光、碘、水
 
2)化學檢出法:化學檢出法是在薄層上使用一種或數種化學試劑與被檢出物質反應,生成有顏色的化合物而定位。這種試劑叫顯色劑。
顯色劑一般分為兩類,即通用顯色劑和專屬性顯色劑
(1)通用顯色劑:
a.濃硫酸或50%的硫酸溶液:極大多數有機物質,噴此種顯色劑后立刻或在加熱到110—120℃并經數分鐘后出現棕色到黑色斑點。
b.酸堿指示劑溶液:例如0.3%溴甲酚綠甲醇溶液,在綠色背景上顯現黃色斑,表示是脂肪族羧酸。常用的通用顯色劑還有:5%磷鉬酸乙醇、堿性高錳酸鉀溶液、硝酸銀-氫氧化銨試劑、熒光顯色劑等。
(2)專屬性顯色劑,指能使某一類或少數幾類官能團或化合物顯色的試劑。
 
3)原位化學衍生化
 
4)生物與酶檢出法
 
5)放射顯影法
 
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